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mRNA合成相关

DNase I (1 U/μL)

DNase I(脱氧核糖核酸酶 I),即Deoxyribonuclease I,是一种可消化单链或双链DNA的脱氧核糖核酸内切酶,它识别并切割磷酸二酯键,产生5‘端为磷酸基团,3‘端为羟基的单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸。DNase I的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子Mg2+、Mn2+等激活。...
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产品介绍

产品概述

DNase I(脱氧核糖核酸酶 I),即Deoxyribonuclease I,是一种可消化单链或双链DNA的脱氧核糖核酸内切酶,它识别并切割磷酸二酯键,产生5'端为磷酸基团,3'端为羟基的单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸。DNase I的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子Mg2+Mn2+等激活。在Mg2+存在的情况下,该酶可随机识别并切割双链DNA任意一条链上的任意位点;而在Mn2+存在的情况下,可识别并切割DNA两条链上几乎相同的位点,产生平末端或有1-2个核苷酸突出的粘末端DNA片段。

 

产品用途

1.适用于RNA提取、体外转录、RT-PCR实验中DNA的去除。

2.用于足迹法(Footprinting)分析DNA-蛋白质相互作用。

3.DNA Polymerase I一起用于切口平移(nick translatioin)。

4.DNA随机片段文库构建。

5.细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。

 

单位定义

37℃ 10 min,将能够完全降解1 μg pUC19质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位(U)

 

来源

大肠杆菌重组表达。

 

保存条件

 -30 ~ -15℃保存,≤ 0℃运输。


 

 

反应条件

37℃孵育15-30 min

 

失活或抑制

加入终浓度为5 mMEDTA并经过65℃加热10 min

 

使用实例

体外转录后去除DNA模板,具体操作如下:

1. 体外转录产物中加入DNase I,每1 ug DNA模板需加入2-4 U DNaseI消化去除。

2. 37℃孵育15 min

3. 加入终浓度为5 mMEDTA65加热10 min终止反应。

 

注意事项

1. 最适pH7.0-8.0

2. 活化剂:DNase I需要二价阳离子以达到最大活性。

3. 抑制剂:EDTA, EGTA, SDS

4. 特异性:降解DNA的双链特异性的核酸内切酶。

5. 使用时将酶置于冰上操作,使用完毕后-20保存。

 

订购信息

产品名称

产品货号

规格

DNase I   (1 U/μL)

SCB0B002A

200μL

DNase I   (1 U/μL)

SCB0B002B

1000 μL

 


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